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高二生物《月季的花藥培養(yǎng)》學案

時間:2017-03-22 17:25:00   來源:無憂考網     [字體: ]
被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊通常包含花絲、花藥兩部分;ㄋ帪槟覡罱Y構,內部含有許多花粉。花粉是由花粉母細胞經過減數分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞。被子植物花粉的發(fā)育要經歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時期,4個單倍體細胞連在一起,進入單核期時,四分體的4個單倍體細胞彼此分離,形成4個具有單細胞核的花粉粒。這時的細胞含濃厚的原生質,核位于細胞的中央(單核居中期)。隨著細胞不斷長大,細胞核由中央移向細胞一側(單核靠邊期),并分裂成1個生殖細胞核和1個花粉管細胞核,進而形成兩個細胞,一個是生殖細胞,一個是營養(yǎng)細胞。生殖細胞將在分裂一次,形成兩個精子。
注意:①成熟的花粉粒有兩類,一類是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管細胞核和生殖細胞核,二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的;另一類是三核花粉粒,花粉在成熟前,生殖細胞就進行一次有絲分裂,形成兩個精子,此花粉粒中含有兩個精子核和一個花粉管核(營養(yǎng)核)②花粉發(fā)育過程中的四分體和動物細胞減數分裂的四分體不同;ǚ郯l(fā)育過程中的四分體是花粉母細胞經減數分裂形成的4個連在一起的單倍體細胞;而動物細胞減數分裂過程中的四分體是聯會配對后的一對同源染色體,由于含有四條染色單體而稱為四分體。③同一生殖細胞形成的兩個精子,其基因組成完全相同。
產生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產生花粉植株(即單倍體植株)一般有兩種途徑,一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物,另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成愈傷組織,再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。
注意:①無論哪種產生方式,都要先誘導生芽,再誘導生根②胚狀體:植物體細胞組織培養(yǎng)過程中,誘導產生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚非常類似的結構,其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似,有胚芽、胚根、胚軸等完整結構,就像一粒種子,又稱為細胞胚。
影響花藥培養(yǎng)的因素誘導花粉能否成功及誘導成功率的高低,受多種因素影響,其中材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素
·親本的生理狀況:花粉早期是的花藥比后期的更容易產生花粉植株,選擇月季的初花期。
·合適的花粉發(fā)育時期:一般來說,在單核期,細胞核由中央移向細胞一側的時期,花藥培養(yǎng)成功率
·花蕾:選擇完全未開放的花蕾
·親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種密度等對誘導成功率都有一定影響
·材料的選。哼x擇花藥時,一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細胞核不易著色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色
·材料的消毒
·接種和培養(yǎng):滅菌后的花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣,并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時,要盡量不損傷花藥(否則接種后容易從受傷部位長生愈傷組織),同時還要徹底去除花絲,因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成,通常每瓶接種花藥7~10個,培養(yǎng)溫度控制在25℃左右,不需要光照.幼小植株形成后才需要光照.一般經過20~30天培養(yǎng)后,會發(fā)現花藥開裂,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織及時轉移到分化培養(yǎng)基上,以便進一步分化出再生植株。如果花藥開裂釋放出胚狀體,則一個花藥內就會產生大量幼小植株,必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培養(yǎng)基上,否則這些植株將很難分開。還需要對培養(yǎng)出來的植株做進一步的鑒定和篩選。
植物組織培養(yǎng)技術與花藥培養(yǎng)技術的相同之處是:培養(yǎng)基配制方法、無菌技術及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于:花藥培養(yǎng)的選材非常重要,需事先摸索時期適宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基;花藥培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的要求更為嚴格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。